Test | Sangue Intero

Un drugtest – o test rapido per la rilevazione di droghe d’abuso – è un dispositivo immunocromatografico competitivo per la rilevazione qualitativa e visiva di determinate sostanze d’abuso e loro metaboliti in un campione biologico di origine umana. Il dispositivo utilizza una reazione antigene-anticorpo altamente specifica per l’identificazione selettiva dei differenti metaboliti nel campione. 

In ogni dispositivo, un coniugato della droga del test compete con la droga libera eventualmente presente nel campione per un numero limitato di siti di legame degli anticorpi. Ciascun tampone reattivo è pre-rivestito di un coniugato immobilizzato della droga sotto forma di antigene nella regione del test (T). Se la droga non è presente nel campione, gli anticorpi si legheranno al coniugato immobilizzato della droga e si formerà una linea visibile: perciò, la comparsa di una linea nella regione T indica l’assenza di droga nel campione o la sua presenza al di sotto del cut-off specificato. 

Al contrario, se nel campione sono presenti i metaboliti della droga in questione, questi competeranno con il coniugato immobilizzato della droga nella regione T per il numero limitato di siti di legame degli anticorpi. Con l’aumentare della concentrazione dei metaboliti nel campione il legame dell’anticorpo viene sempre più inibito ed il colore della linea risulterà più tenue. Quando la concentrazione è pari o superiore al cutoff specificato, essa impedirà il legame dell’anticorpo al coniugato della droga e la linea sparirà gradualmente: pertanto, l’assenza di formazione di una linea colorata nella regione T indica un risultato positivo per quella particolare sostanza.

Un vantaggio importante del sangue intero come matrice biologia per eseguire un drugtest consiste nel suo essere relativamente omogenea poiché i parametri fisiologici possono

variare entro limiti ristretti e la droga può essere rivelata appena dopo l’assunzione prima che venga metabolizzata e filtrata; lo svantaggio, tuttavia, è costituito dall’invasività del prelievo, dalla limitata quantità di campione, dalla difficoltà di conservare opportunamente il campione o dalla difficoltà di analisi quando il sangue è vecchio, emolizzato o prelevato postmortem.

Cutoff è una parola inglese, di uso comune nei test rapidi, e indica il valore soglia di rilevazione di un dispositivo, ossia la concentrazione minima di quel determinato analita (che può essere una droga ma anche un marker diagnostico o un antigene infettivo) a partire dalla quale il test rapido in questione restituirà un risultato positivo. Per le caratteristiche tecniche soggiacenti al funzionamento di un test rapido immunocromatografico, il valore soglia di rilevazione non può mai essere 0 (zero) ma deve necessariamente riprodurre una concentrazione minima rilevabile che può variare a seconda dell’analita, o composto, che si vuole identificare.

Il test viene interpretato visivamente sulla base della comparsa, o meno, di determinate linee di rilevazione: nel caso non venga riscontrata la presenza della droga o metabolita nel campione, si osserverà la comparsa di due linee colorate (regione del test e regione di controllo) mentre, nel caso venga rilevata la presenza della droga o metabolita nel campione, si osserverà la comparsa di una sola linea colorata (regione di controllo). Fare riferimento alle schede tecniche di ogni prodotto per informazioni più dettagliate.

Un risultato negativo ottenuto con un test rapido per droghe d’abuso (indicato dalla presenza di linea colorata visibile nella regione del test T del dispositivo, trascorso il tempo necessario per la lettura dei risultati) significa che il campione utilizzato per eseguire il test non contiene una concentrazione di quella determinata droga/metabolita tale da essere rilevata dal dispositivo: questo non significa necessariamente che la droga/metabolita sia del tutto assente nel campione, ma che la concentrazione della stessa – anche se presente – è INFERIORE al limite soglia di rilevazione del dispositivo.

Un risultato positivo (indicato dalla assenza di linea colorata visibile nella regione del test T del dispositivo, trascorso il tempo necessario per la lettura dei risultati), al contrario, significa che il campione utilizzato per eseguire il test contiene una concentrazione di quella determinata droga/metabolita SUPERIORE al limite soglia di rilevazione del dispositivo. Un risultato positivo indica semplicemente la presenza di una determinata droga nel campione e non fornisce una misura del livello di intossicazione né tantomeno una possibile quantificazione della concentrazione della droga stessa nel campione.

Si ritiene opportuno sottolineare come qualsiasi test rapido per droghe d’abuso restituisca unicamente un risultato analitico preliminare di tipo qualitativo. Una metodica alternativa di analisi è necessaria per confermare ogni risultato ottenuto attraverso l’utilizzo di un test rapido, soprattutto in presenza di risultati positivi presuntivi.

Ogni dispositivo è fornito di una regione di controllo per verificare la corretta esecuzione del test, caratterizzata da una differente reazione antigene/anticorpo (regione C sulla finestra dei risultati). Una linea colorata in corrispondenza di questa regione deve sempre comparire, a prescindere dalla presenza o meno del metabolita della droga nel campione analizzato. Se la linea di controllo non compare, il dispositivo va scartato e ogni risultato ottenuto considerato come non valido. 

La comparsa della linea di controllo nella zona corrispondente attesta che è stato utilizzato un quantitativo di campione sufficiente e che è stato ottenuto un flusso adeguato di campione nella regione del test.

La linea di rilevazione nella regione del test (regione T) può assumere diversa intensità, in considerazione delle caratteristiche organolettiche del campione, così come per altri fattori (temperatura ambientale di esecuzione del test, fenomeni di condensa, quantitativo del campione applicato). Ciononostante, la presenza di una linea visibile nella regione del test, trascorso il tempo necessario per la lettura del risultato, è indice di un risultato negativo, a prescindere dall’intensità della linea stessa e non deve sussistere alcun dubbio interpretativo in tal senso.

Un campione di sangue intero, prelevato da operatori qualificati nel pieno rispetto delle procedure e delle normative, non trattato con agenti anticoagulanti ed immediatamente testato, rende completamente impossibile una qualsiasi adulterazione del campione, sia essa volontaria o anche involontaria.